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發布時間:2021-10-23 08:46  
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蛋白結晶自動化
1.能夠進行多種不同方法的加樣:氣相擴散法(包括坐滴法和懸滴法); 2.坐滴懸滴蛋白以及篩選液的加樣針頭為八通道,針頭必須可自動清洗重復使用,也必須可自動更換; 3.儀器具有全自動濕度控制功能,儀器內部帶有濕度感應器,實時控制濕度,并且軟件界面實時顯示濕度數據,有效控制樣本液體揮發,提高實驗可重復性;(gryphon沒這個功能) 4.至少有三個微孔板位和一個深孔板位;后期能擴展升級,增加樣本池液整板分配功能,可自動從深孔板分配到微孔板。 5.八通道加樣頭須具備獨立傳感器,確保點樣,并有效防止漏點和誤操作,更好地適應板面高低不平產生的誤差; 6. 大和小加樣容量:坐滴盤和懸滴盤:60nL – 1200nL; 7.加樣時間:96孔標準盤(坐滴盤和懸滴盤):≤5分; 8.兼容市面上所有的96孔標準盤(坐滴盤和懸滴盤); 9.加樣精度:無論液體種類和粘度100nl時CV=5%; 10.加樣模式:可以一次吸取多次加樣; 11.機械定位精度:Z方向=50um; X, Y方向200um; 12.加樣區域完全封閉,無外界干擾。
蛋白結晶板
蛋白質溶液和含有沉淀劑的溶液是彼此分層在一個有小孔的毛細管中,一個測熔點用的毛細管一般即可(如圖1.2)。下層是密度大的溶液,例如銨或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀劑,它會在上層。以1:1混合,沉淀劑的濃度應該是所期終濃度的二倍。兩種溶液(各自約5μl)通過針頭導入毛細管,先導入下層的。通過一個簡易的搖擺式離心機去除氣泡。再加入上層,進而兩層之間形成一個明顯的界面。
盡管近些年來在蛋白質結晶的理論、方法和技術上已取得巨大發展,獲得衍射良好的蛋白質晶體仍然是利用X-射線解析蛋白質結構的一個主要瓶頸問題。這里我們發展了一種新型的蛋白質結晶方法—固液界面方法,即SLIM。該方法主要包括兩個部分1)預先加入并干燥蛋白質母液;2)進行晶體生長的時候,直接將蛋白質溶液加入'干母液'中,從而產生一個固體(干母液)和液體(蛋白質溶液)的界面。該方法不僅操作簡單、快速,而且降低了對蛋白質溶液濃度的要求。