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發布時間:2020-12-08 10:55  
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在前PCR區建立PCR混合物:
⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃,在實驗室只涉及到擴增一種或少數幾種特異序列時這樣做很有用。
⑵如果你的實驗室使用多套引物,以致于配制包括所有試劑的單一反應混合物不夠經濟,可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。
⑶作為一個規則,應該保存一套陰性、弱陽性和強陽性對照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。而且,你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴增抑制物。
⑷陰性樣品要與每組樣品同時做,以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產物的污染,陰性對照應該包括核酸以外的所有試劑。
⑸當做陽性對照時,有兩個理由決定了應該使用很少數量的核酸。
⑹由于必須有對照反應,對照模板的特點應該予以考慮。
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PCR實驗室嚴格的管理
(1)嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室,有條件的情況下要設置獨立的通道和進出整個實驗區的門;
(2)盡量減少在實驗區內不必要的走動以減少交叉污染的可能性。
(3)擴增產物分析區是主要的擴增產物污染來源,廢液不能在實驗室中傾倒,必須經消毒液浸泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉,用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒后統一處理,如焚燒等;
(4)擴增產物分析區可能會用到某些可致基因突變和有毒物質,應特別注意實驗人員的安全防護。
pcr實驗室凈化屏障環境設施該如何維護?
任何東西的維護保養,都需要先了解熟悉它的組成部分,pcr實驗室也不例外,而在維護pcr實驗室時,需要先熟悉屏障環境的組成,因為現在的pcr實驗室的屏障環境設施比以前的更為復雜,pcr實驗室凈化屏障環境設施該如何維護?
其組件包括空調機組、冷熱水機組、冷卻器機組、水泵、冷熱水管、蒸汽管、水閥、自動控制閥和各種傳感器。用于聚合酶鏈反應實驗室凈化的凈化空調箱包括鼓風機、表面冷卻器、輔助電加熱器、加濕器、中低效率過濾器、排氣柜、凈化空氣導管、可變風量閥、智能中央控制系統等。
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凈化車間區與控制區的建筑裝修應便于清洗、維護,表面要平整,不應有顆粒性物質脫落。根據規范要求,室內裝修一般應滿足的幾點要求。
凈化車間的圍護結構和室內裝修材料宜選用氣密性良好,同時在溫度、濕度等變化時,本身變形小的材料;墻壁和頂棚表面應光潔平整、不起灰、不落塵、耐腐蝕、耐沖擊、易清洗。為了使凈化車間的建筑表面盡量少積灰、易清掃,應在建筑構造上避免或減少凹凸面,墻面與地面、墻面與頂棚、墻面與墻面的相接處也不宜做成一般的直角,宜做成半徑大于或等于50mm的圓角。壁面涂層的色彩要和諧、雅致、素淡,以便于顯現壁面上的污染物。同樣,地面也應做到平整、無縫隙、耐磨、耐腐蝕、耐沖擊、不積聚靜電、易除塵清洗。