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發布時間:2021-08-23 16:56  
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什么是試劑盒?
ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯試劑盒、酶聯吸附測定試劑盒、酶聯分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯吸附測定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。
Elisa試劑盒技術原理
(1). 抗原或的固相化及抗原或的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面a的抗原或仍保持其活性。
(3). 酶標記的抗原或既保留其活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或起反應。再加入酶標記的抗原或,也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以反應為基礎,將抗原、的特異性反應與酶對底物的有效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
Elisa試劑盒操作步驟
1.用蓋片鑷Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片完全浸在培養液中;
5.將Elisa試劑盒培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。
Elisa試劑盒操作注意事項
1.Elisa試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按污染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。