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發布時間:2020-08-24 10:40  
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RCCS?的原理和優勢
相比動態和靜態組織培養系統,RCCS的主要優勢是其能提供理想的環境,從而允許細胞聚集、3維生長和分化。這個優勢使得我們的培養環境非常接近于體內。
在大多數的動態培養系統中細胞/組織會受損,這主要是其與推進器接觸而致。那么它為何會與推進器接觸呢?因為懸浮,那懸浮是如何產生的?這歸因于以下2個力:
1.受到推進器產生的力;
2.在培養的氧交換和懸浮過程中噴出的氣泡所產生的 剪切力。
在靜態的平面培養瓶/培養皿中,2維的環境和塑料基質會改變基因表達和阻止分化。 相比之下,在RCCS?中生長的細胞/組織因隨機變化的重力矢量而懸浮,從而在培養液中成連續的自由落體狀態。一個較好的比喻是:細胞從無限高的充滿液體的管中落下。組織在培養液中會落下、翻滾和混合,受不到任何主宰生長方向的單個重力矢量的影響;組織會向各個方向生長。這就是RCCS?的機制。
由于系統無推進器、空氣升液器、氣泡或攪拌器,使破壞性應力減到1小。因維持在一個理想的流體軌道中,故細胞能共同生長、互相交流和形成3維的結構。
此外,RCCS?是目前唯1的能使研究者進行共同培養,而這種培養能提供本能的分化、高細胞增殖、低的細胞率和增加細胞產物的分泌。
污染途徑 污染物,特別是微生物常通過下列途徑進入培養體系,造成污染
1、空氣:空氣是微生物及塵埃顆粒傳播的主要途徑。空氣流動性大,如果培養操作場地于外界隔離不嚴格或消毒不充分,外界不潔空氣很容易進入造成污染。因此,培養設施不能設在通風場所。無菌操作應在凈化臺內進行,工作時要帶口罩,以免因講話、咳嗽等使外界污染進入操作面,造成污染。
2、器材:各種培養器皿、器械消毒不徹底和洗刷不干凈導致污染,另外需要對培養箱進行定期消毒,防止形成污染
3、操作:實驗操作無菌觀念不強,技術不熟練,使用污染的器皿或封瓶不嚴等,都可以造成污染。培養兩種細胞以上時,操作不規范,交叉使用吸管或培養液、瓶等有可能導致細胞交叉污染。
4、血1清:有些血1清在生產時就已經被支原體或病毒等污染,變成了污染。
5、組織樣本:原代培養的污染多數來源于組織樣本;取材時碘酒消毒后脫碘不徹底,可造成碘混入組織,細胞或培養液中,影響細胞細胞生長。
RCCS將細胞研究帶入更多元化、更進一步的領域?
RCCS 將細胞研究帶入更多元化、更進一步的領域,應用范圍十分廣泛,無論在學術研究或臨床研究上都有相當的應用價值。無論是培養人體組織以進行治1療的研究,或是培養替代的組織,進行再生醫學及細胞治1療,例如肝1臟、皮膚、骨1髓、、心肌、肺或其他組織等,均提供了ZU佳的研究系統,以達到接近體內環境的條件。科學家更可利用此系統進行腫1瘤細胞、病毒或其他可生產蛋白質、酵素、荷爾1蒙、抗原或抗1體等重要物質的細胞的培養。 RCCS 這樣的系統還提供了 ex vivo 培養環境,研究者可利用 RCCS 以探討微環境因子,對細胞分化和功能的影響。
細胞周期檢測技術
細胞周期指由細胞分裂結束到下一次細胞分裂結束所經歷的過程,所需的時間叫細胞周期時間。
常用的方法:流式檢測細胞周期,標記有絲分裂百分率法。
細胞凋亡檢測
常見檢測方法:流式檢測細胞凋亡,線粒體膜電位,活性氧檢測,Hoechst染色,電鏡,TUNEL。
細胞轉移能力檢測
常見檢測方法:細胞劃痕實驗,Transwell實驗,Invasion實驗
其他實驗
細胞程度:軟瓊脂實驗
細胞屏障:跨膜電阻、熒光黃透過率
細胞粘附實驗
共培養實驗
裸鼠成瘤實驗