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PCR實驗室基本知識介紹

PCR實驗室基本知識

1、四個過程

(在這里面的醫學檢驗、病理、分子生物等專業的人都基本了解，SICOALB就不多重復了，簡單說一下)PCR 實驗室又叫基因擴增實驗室，是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱，用于放大特定的 DNA 片 段，可看作生物體外的特殊 DNA 。完成一組 PCR 實驗，通常需經過試劑準備、樣品制備、核酸擴增和產物分析 4 個過程。

2、單向

為避免交叉污染，進入各個區域的工作流程須嚴格遵循單一方向進行，按照清潔-半污染-污染的順序排列，各區內的試劑和耗材不能再進入任何“上游”區域。也就是(試劑準備區-樣品制備區-核酸擴增區-產物分析區)。

常壓PCR實驗室建設的要點。 負壓送風系統流向：使用獨立的全新風潔凈空調機組，通過潔凈保溫管道加壓至試劑準備間、樣本間、分析間。PCR實驗室的空氣流向必須嚴格按照試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區空氣壓力逐漸遞減方式進行，防止擴增產物順空氣氣流進入擴增前的區域。各個區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產生假性結果。需要嚴格的通風設計，若通風設計不合理，會使風速流向混亂，甚至危害人們健康。

PCR實驗室可分為2個大的功能工作區域：

核酸擴增前區和核酸擴增后區。核算擴增前區包括試劑準備間和樣本制備間，這個兩房間各自獨立，不能出現空氣互通，這兩個房間相對外界氣壓呈正壓狀態。核酸擴增后區包括擴增區和產物分析區，使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室，這個兩區域可以合并為一個房間。這個區域如果是分開兩個房間，這兩個房間也必須是各自獨立，不能出現空氣互通。核算擴增后區對外界氣壓呈負壓狀態。