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              發布時間:2021-08-17 20:22  

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              篩選顆粒進入 HPLC系統后,柱子的入口端被篩板擋住,終導致柱子堵塞,表現出系統壓力增大,色譜峰變形。為此,應采取多種預防措施,包括商品儀器本身的操作步驟及各種過濾設計,努力防止或減少微粒進入 HPLC系統,從而延長儀器及色譜柱的使用壽命,提高數據的可靠性。HPLC系統中,顆粒物的來源主要有三種:流動相、試樣以及儀器系統各部件的磨損。1、流動相若流動相都是 HPLC級溶劑,則無需對流動相進行過濾。由于 HPLC級別的,如、等,在生產工藝過程中均經過0.2μ m微孔濾膜過濾。與此類似,不管你是購買的 HPLC級別的水,還是用實驗室的超純水凈化系統配制而成,一步也要經過0.2μ m的微孔過濾器。

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              流相通過0.45μ m的微孔濾膜過濾是去除流動相中所有顆粒的一種有效方法。0.2μ m微孔的濾膜也能用,但就這一應用而言,它們并不比0.45μ m的微孔濾膜更有效,過濾速度會更慢,尤其是在實驗室所用試劑和水質量不佳的情況下。有人建議,實驗室在編寫其流動相制備標準操作程序(SOPs)時,應借鑒國際上同類實驗室的規定,即:只用 HPLC級液體制備流動相時無需過濾,相反,所有流動相組成在使用前都要過濾。輸液瓶與泵接的輸液管末端入口采用沉式過濾器(一般材料為熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬兩種)。這種濾清器規格為大于10μ m的微孔物質,因此它不能替代流動相過濾步驟,但它可以清除系統內的灰塵,保證儲液瓶、輸液管使用的可靠性。


              儀表系統部件的磨損另外,在 HPLC系統中,另一個重要的微粒體是輸液泵的密封墊和進樣閥旋轉軸磨損。對輸液泵密封墊片磨損更換有兩種不同建議。個建議是,在普通實驗室輸液泵的密封墊使用壽命一般為六個月至一年,因此建議半年或一年更換這些密封墊,實驗室應根據上述觀點制定定期的預防性保養計劃。此觀點認為,相對于輸液泵中的密封墊顆粒堵塞柱子進行更換費用而言,更換密封墊的成本要低一些。有些輸注泵配有玻璃砂芯或篩網,可濾掉泵密封墊中磨損的微粒,防止這些微粒隨流動相流向柱頭。如果這種設備應該參考輸液泵使用說明書,查看建議的清洗或更換過濾器的間隔時間。還有一種建議是,原來密封墊的密封效果好,更換后容易造成流動相滲漏。因此,不要輕易更換密封墊,只要不漏液。沖洗保證 HPLC系統正常工作的第三個關鍵是保持系統的干凈。您必須關注流經系統的所有流動相,對于這些地方經常出現的沖洗會使您的系統處于“Ready”狀態。

              流動相儲罐開始時要經常清洗流動相儲液瓶,或每做一批新的樣品來替換流動相。注入的流動相會受到不潔的貯液瓶的污染。在儲存罐中,緩沖液的使用時間不能超過一周,的使用時間不能超過一個月。還有人建議在儲液瓶中用溶劑填充,直到更換分析方法儲液瓶需要更換新的溶劑(流動相組成發生變化)時,將舊的溶劑倒掉更換新的溶劑,這樣比把溶劑用完更好。但是對于分析樣本較少的實驗室來說,這似乎有點浪費。儀表公司的工程師建議儲水瓶每天都要更換,每個星期還要用異清洗一次。有些實驗室則在水中添加0.1~1 mM的甲酸,以抑制微生物生長。這樣的作法看似繁雜,卻能起到“磨刀不誤”的作用。



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              一般情況下,更換活塞密封墊后,應按照密封墊安裝的步驟進行磨合,但不能用在正相密封墊上。☆當泵頭安裝有柱塞清洗附件時,由于該附件中還設有密封墊,因此活塞桿運動時的阻力將增大。因此在開泵之前,一定要用10%的異,并把它的流速調到大約2-3滴/分鐘,使溶液流過沖洗裝置。(對 SL泵來說,如果不用鹽溶液即可)10%異可以幫助降低水的表面張力,具有抑制細菌的作用。請勿使用其他溶劑。如果泵頭沒有打開10%異,安裝沖洗附件,就會縮短密封墊和活塞桿的壽命(除二元泵 SL外),泵頭如果發出“吱吱”聲不影響使用和泵的精度,可改變壓縮因子(compressibility)。

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              自動進樣器樣本必須在進樣前進行適當的預處理,要經過亞微米級濾膜的過濾或離心,以防止樣品中的微小顆粒堵塞管道,好是用流動相作為配制樣品的溶劑,該溶劑對樣品應具有良好的溶解性能。當喇叭口朝上暴露在空氣中時,有時空氣中較大的塵埃顆粒碰巧落在針座的流道內,導致針座堵塞。此時可試著將針座卸下來,把它接在泵出口上反沖,一般可以解決問題。如緩沖液頻繁使用, ALS計量泵除泵頭外的柱塞和密封圈,應定期清洗六通閥的轉子密封圈和定子密封圈,防止有鹽粒子磨損 ALS必須使用 Agilent的樣品瓶及瓶蓋;使用不兼容的或加工精度差的樣品瓶及瓶蓋,會導致 ALS故障率上升,并降低產品性能。



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