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發布時間：2021-10-17 07:18
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色譜柱的技術都有哪些？比如，封尾等，這些技術在應用時都體現在哪里？
色譜柱技術包括填料技術，封尾技術和裝柱技術等，填料技術自不待言，填料的差異對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響，色譜填料的鍵合相密度的不同也會影響到填料表面硅羥基外露的多少，進而影響填料的選擇性。封尾技術中用到的封尾試劑的差異也會對色譜柱的性質產生很大的影響，如體現在色譜填料的pH耐受范圍，水相耐受范圍，極性強弱等。裝柱技術也沒有想象中的這么簡單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內徑和長度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩定、均一的柱床，更多是一門藝術，需要經驗積累。
液相色譜儀在食品安全中的應用
液相色譜儀是一種新型綜合分離分析儀器，在液相色譜儀的分離技術基礎上加入了液相色譜技術，對分離完成的被測食品基本成分進行液相色譜分析，并以高壓輸出的方式實現對檢測結果的輸出，Z終形成對被測食品質量的綜合檢測結果。在這一過程中液相色譜儀技術對被測物質的分離主要是靠分離組分的分子與流動相分子爭奪吸附表面活性中心的吸附能力差別而實現的。
液相色譜的操作步驟
1).首先對流動相進行過濾，根據需要選擇不同的濾膜，一般為有機系和水系，常用的孔徑為0.20um和0.45um。
2).對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
3).正常情況下，儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘，然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑，則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘，直至色譜柱中有機相沖凈為止)。
4).一般情況下，流動相沖洗20-30分鐘后，儀器方可穩定，重要的是儀器基線走后，方可進樣測試。
5).同時進兩針標樣，將其結果相比較，其結果的比值在0.98-1.02之間后，就可以正式進行樣品的測試了。
6).樣品測試結束后，就要進行色譜儀及色譜柱的清洗和維護。如流動相為緩沖試劑，同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘，方可用有機相進行保護，否則，有損色譜柱。
7).關機時，先關計算機，再關液相色譜。
8).填寫登記本，由負責人簽字。
制備液相色譜特點和優點
高壓—壓力可達150~300Kg/cm2。色譜柱每米降的壓為75 Kg/cm2以上。
高速—流速為0.1~10.0 ml/min。
高效—可達5000塔板每米。在一根柱中同時分離成份可達100種。
高靈敏度—紫外檢測器靈敏度可達0.01ng。同時消耗樣品少。
HPLC與經典液相色譜相比有以下優點：
速度快—通常分析一個樣品在15~30 min，有些樣品甚至在5 min內即可完成。
分辨率高—可選擇固定相和流動相以達到較好分離效果。
靈敏度高—紫外檢測器可達0.01ng，熒光和電化學檢測器可達0.1pg。
柱子可反復使用—用一根色譜柱可分離不同的化合物。
樣品量少，容易回收—樣品經過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。
